Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析

Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析

①微笑條帶 

解析：由于凝膠的中間部分凝固不均勻所致，多出現(xiàn)于較厚的凝膠 

處理辦法：配膠時(shí)一定要充分混勻，待其充分凝固后再做后續(xù)試驗(yàn) 

②帶出現(xiàn)紋理現(xiàn)象 

解析：樣品不溶性顆粒 

處理辦法：加樣前最好是離心一下樣品

③電泳條帶粗

（這是個(gè)內(nèi)參 β-actin） 

解析：蛋白樣品沒有濃縮，量太大 

④條帶出現(xiàn)好多洞洞

解析：轉(zhuǎn)膜的時(shí)候沒有把三明治里的氣泡干掉

Western Blot是生物學(xué)上一種非常常用的實(shí)驗(yàn)方法，與之相似的還有Southern Blot和Northern  Blot。但 WB 失敗的情況也很多，有一些小技巧來盡量減少失敗的概率。

“我的 WB 又沒有雜出來，太桑心了" 

“哇靠你的 WB 又沒有雜出來，用掉多少抗體了，還買進(jìn)口的！"

“哇靠你的 WB 又沒有雜出來，卻一直一輪又一輪的占用著蛋白電泳儀，我等到黃花都謝了！"

這些聲音貫穿了很多人的整個(gè)研究生生涯，WB，虐你無數(shù)遍，然而鳳凰涅盤然后浴火重生，從 WB 中參悟到了正確應(yīng)對失敗的人生道理。而在正確應(yīng)對失敗的同時(shí)，我們也要學(xué)會(huì)如何避免失敗。