實時熒光定量PCR的優(yōu)化（二）

如果你所研究的靶序列有前人建立過實時熒光定量PCR的方法，就可以在公共數(shù)據(jù)庫中查找，查看擴增效率、特異性、靈敏度等信息，省去從頭開始的時間。

注意，使用前人建立的方法前，需要再次驗證這個方法的參數(shù)是不是符合描述。防止長時間重復實驗，卻得不到想要的結(jié)果的人間慘劇。

推薦的公共引物探針數(shù)據(jù)庫：

1、RTPrimerDB

這個數(shù)據(jù)庫內(nèi)的約6000個基因，來自人、擬南芥、大鼠等21個物種，相對其他數(shù)據(jù)庫豐富。這些引物和探針，也是經(jīng)過驗證的，70%已發(fā)表。使用該數(shù)據(jù)庫時建議通過網(wǎng)絡(luò)代理登錄。

2、PrimerBank 

這個數(shù)據(jù)庫內(nèi)的探針引物是通過算法設(shè)計得到的，主要包括人和小鼠的基因。數(shù)據(jù)庫內(nèi)的小鼠引物，經(jīng)過廣泛驗證后，被證實有83%的成功率。

3、Real Time PCR Primer Sets 

這個數(shù)據(jù)庫內(nèi)的引物和探針都經(jīng)過測試、優(yōu)化，針對多種生物設(shè)計，包括人、小鼠、大鼠等的基因。