細(xì)胞轉(zhuǎn)染后總是污染，該如何處理？

有部分同學(xué)在做轉(zhuǎn)染時(shí)，總會(huì)有這樣的疑問(wèn)：細(xì)胞養(yǎng)著沒(méi)問(wèn)題，鋪板第二天也沒(méi)問(wèn)題，狀態(tài)都很好，然后轉(zhuǎn)染第二天早上看就污染了，已經(jīng)重復(fù)三次了，回回都是這樣，為啥呀？提的質(zhì)粒用0.45um濾膜過(guò)濾了，別的實(shí)驗(yàn)也用了，沒(méi)問(wèn)題。鋪板剩下的細(xì)胞放在t25養(yǎng)了，至今狀態(tài)都還很好，只有六孔板里面的污染了，百思不得其解……

針對(duì)這方面問(wèn)題，以下小編整理出幾個(gè)解決方案：

1、建議換個(gè)液看看，看看鏡頭里面的圖片，像不像典型的污染？如不太像典型污染，那如果液體不澄清，背景臟，那可能真的是污染。沒(méi)事兒，正常換液，主要操作的時(shí)候別與其他細(xì)胞一起操作。每次換液的時(shí)候，先用雙抗原液清洗一下細(xì)胞。就算是細(xì)菌污染也不太要緊，一般通過(guò)抗生素洗滌和換液頻率都能夠挽救回來(lái)。當(dāng)然了，如果你的細(xì)胞不是很珍貴，那你要評(píng)估一下有沒(méi)有挽救的必要。

2、可以試試用0.22um濾膜過(guò)濾。

3、轉(zhuǎn)染如果自己提質(zhì)粒的話(huà)，一般也可不過(guò)濾， 用去內(nèi)毒素大抽試劑盒提，大概每個(gè)樣100塊，轉(zhuǎn)染后也沒(méi)問(wèn)題。

4、有同學(xué)以前做的轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)也是會(huì)污染，現(xiàn)在是在完培里面加了1%的雙抗，就不會(huì)污染了。整個(gè)轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)過(guò)程中只有配制轉(zhuǎn)染試劑時(shí)用的純DMEM，其他的給藥和鋪板都用含有雙抗的完培。

以上就是小編整理出來(lái)的幾個(gè)答案，希望可以幫到廣大同學(xué)，轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)順順利利，發(fā)表的文章都能見(jiàn)刊～