細胞培養(yǎng)問題集錦問與答（四）

細胞培養(yǎng)系列第四期，繼續(xù)為大家分享細胞培養(yǎng)中遇到的問題集錦。

16、

問：買的無血清凍存液說明書上寫的直接放入-80度

答：那是直接凍存的，大多數(shù)凍存液都是梯度凍存

17、

問：初學(xué)細胞培養(yǎng)，養(yǎng)的是hepG2，每次到3天的時候培養(yǎng)基就會發(fā)黃，鏡下看到像是死細胞聚集成團的大片東西，請問這種情況是染菌了嗎？請問如何處理?那種像死細胞聚集成團的感覺是綠色，請問這是染菌嗎？（不是每次這樣，之前都很好，現(xiàn)在三瓶里有一瓶出現(xiàn)這種情況）

答：綠色的感覺像真菌，也有可能是細胞密度高了，細胞代謝物多。

18、

問：有用清除劑處理過一禮拜，看著挺干凈，但是一禮拜培養(yǎng)三代又出來了，這種是沒清除干凈還是，可能環(huán)境有污染重復(fù)的染到了？

答：這個污染比較頑固，至少要殺2周，甚至一個月

19、

問：真菌污染一般原因是什么啊

答：真菌里的根霉一般是環(huán)境

20、

問：貝克曼細胞計數(shù)儀中DT值是啥意思？轉(zhuǎn)染后DT值會增加嗎？為什么會增加呢？

答：是群體倍增時間，就是細胞數(shù)增長一倍需要的時間，一個常用的評價細胞生長的指標。我們接觸的一般是增加的。大量表達外源蛋白，會占用細胞生長的資源，這個可能是主要因素。外源基因插入基因組可能也有影響。

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