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    認識黑膠蟲的真面目（上）

    發(fā)布時間： 2022-01-04　　點擊次數： 3116次

    江湖上流傳很久的黑膠蟲，到底真實身份是啥？

    今天讓我們一起來扒一扒~


    我們收集了全國29個黑膠蟲污染樣本進行DNA提取、測序、數據庫比對，得到了鑒定結果，一起和大家分享一下吧。



    表：黑膠蟲檢定

    微生物種屬樣本數
    		G+/G-形狀
    		直徑大小
    Mycoplasma  hyorhinis
    （豬鼻支原體）    		3//0.15~0.3 μm
    Mycoplasma bovis
    （牛支原體）    		1//0.15~0.3 μm
    Mycoplasma pulmonis
    （鼠肺支原體株）    		1
    		//0.15~0.3 μm
    Mycoplasma yeatsii
    （山羊支原體）    		6
    		//0.15~0.3 μm
    Actinobacterium sp.
    （放線菌屬）    		1G+絲狀寬度近于桿狀細菌，直徑0.5~1 μm
    Ralstonia sp.
    （羅爾斯通菌屬）    		1G-桿狀1.2×2.5~3.5 μm
    Brevundimonas sp.
    （短波單胞菌屬）    		1G-桿狀0.4~0.5×1-2 μm
    Blastomonas natatoria
    （泳池芽殖單胞菌）    		1G-卵圓形或桿狀/
    Pseudomonas sp.
    （假單胞菌）    		1
    		G-桿狀(0.5～1)×(1.5～4) μm
    Sphingobium sp.
    （鞘脂菌屬）    		1G-桿狀/
    Sphingomonas sp.
    （鞘氨醇單胞菌）    		5
    		G-桿狀0.3~0.8×1.0~2.7 μm
    Methylobacillus sp.
    （甲基菌屬）    		1G-桿狀0.8~1.0×1.0~8.0 μm
    Microbacterium sp.
    （微桿菌屬）    		2G+桿狀1~10×0.2~0.6 μm
    Herbaspirillumhuttiense
    （赫氏草螺菌）    		4G-螺旋型長度至數十微米；螺旋波長為5~15 μm，螺旋幅度約一乃至數微米


    如上表格所示：在這29個樣本中，有11個樣本鑒定為支原體，種類分別為豬鼻支原體、牛支原體、鼠肺支原體、山羊支原體。18個樣本鑒定為細菌，種類分別為放線菌屬、羅爾斯通菌屬、短波單胞菌屬、泳池芽殖單胞菌、假單胞菌、鞘氨醇單胞菌、甲基菌屬、微桿菌屬、赫氏草羅菌。



    支原體污染 


    本次實驗中，有11個樣本鑒定為支原體污染。首先，我們先來了解一下支原體的基本特征。

    逍鵬生物實驗室在做沉降菌檢測的時候，竟然出乎意外地培養(yǎng)出了一株支原體。支原體集落呈“荷包蛋樣"：圓形，核心部分較厚，向下長入培養(yǎng)基，周邊為一層薄的透明顆粒區(qū)。

    圖片

    圖1. 支原體菌落

    圖片

    圖2. 電鏡下的支原體

    圖源網絡，僅供參考學習用


    在電子顯微鏡下，支原體大小為0.15~0.3 μm，無細胞壁，不能維持固定的形態(tài)而呈現多形性，呈球形、球桿形、長絲狀及分支狀等。


    豬鼻支原體  


    圖片

    圖3. 固體培養(yǎng)基上的豬鼻支原體集落

    圖源網絡，僅供參考學習用


    鑒定結果：樣本1，6，15 為 Mycoplasma hyorhinis（豬鼻支原體）

    大?。?.15~0.3 μm

    感染宿主：其感染豬的上呼吸系統(tǒng)的上皮細胞，通過口鼻途徑傳播。小豬可以被母豬或它們的同伴（無癥狀攜帶者）感染

    污染細胞途徑：推測胰蛋白酶主要是從豬的胰臟提取，純化獲得的結晶，再制成的凍干制劑，過濾除菌不當的胰酶溶液可能攜帶豬鼻支原體，建議大家買品牌胰酶，降低污染風險


    鼠肺支原體  


    圖片

    圖4. 固體培養(yǎng)基上的鼠肺支原體株

    圖源網絡，僅供參考學習用


    鑒定結果：樣本12 為 Mycoplasma pulmonis（鼠肺支原體）

    大?。?.15~0.3 μm

    感染宿主：大鼠和小鼠是主要的宿主。寄生于呼吸道上皮頂膜，附著感染從鼻前通道到肺泡的任何地方，可能是由表面糖蛋白介導的

    污染細胞途徑：在提取鼠源的細胞，例如鼠巨噬細胞，鼠肺動脈上皮細胞，鼠原代海馬神經元時，如果提取的鼠帶有鼠肺支原體，就有可能會引入污染


    牛支原體  


    圖片

    圖5. 固體培養(yǎng)基上的牛支原體株

    圖源網絡，僅供參考學習用


    鑒定結果：樣本28 為 Mycoplasma bovis（牛支原體）

    大?。?.15~0.3 μm

    感染宿主：主要寄生于牛體內，感染部位廣泛，感染牛的呼吸道，會引起肺炎、中耳炎、關節(jié)炎、結膜炎

    污染細胞途徑：推測細胞增殖的主要營養(yǎng)之一就是胎牛血清。胎牛血清來源于動物，其主要通過0.1μm濾膜過濾除菌。如果血源及過濾除菌不當，就會給細胞帶來潛在的支原體污染，因此建議大家購買品牌的胎牛血清

    山羊支原體  //


    圖片

    圖6. 固體培養(yǎng)基上的山羊支原體株

    圖源網絡，僅供參考學習用


    鑒定結果：樣本9，10，17，18，19，20 為Mycoplasma yeatsii（山羊支原體）

    大?。?.15~0.3 μm

    感染宿主：主要寄生于山羊體內，感染部位廣泛，寄生于羊的外耳道，咽后淋巴結、肺、脾

    污染細胞途徑：此類污染來源異常詭異，因為大家平時培養(yǎng)的細胞來源或營養(yǎng)體系，很難接觸到此類污染的環(huán)節(jié)，故很難推測到污染源頭。若培養(yǎng)相關的細胞或者使用相關的營養(yǎng)體系，就比較容易推測污染來源了


    //  小結  //

    如果黑膠蟲的真實身份是支原體，那么支原體本身不會游動，不符合黑膠蟲污染活躍游動或原地打轉、顫動的特征，故推測可能細胞本身存在潛在的支原體污染，剛好被檢測出來了。


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