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    如何提高腫瘤細胞培養(yǎng)存活率和生長率？

    發(fā)布時間： 2022-10-20　　點擊次數(shù)： 1070次

    原理

    根據(jù)人們的經(jīng)驗，腫瘤細胞在體外不易培養(yǎng)，建立能傳代的腫瘤細胞系更為困難。

    當(dāng)腫瘤組織或細胞初代接種培養(yǎng)后，常出現(xiàn)以下幾種情況：


    1.  *無細胞游出或移動；

    2.  有細胞移動和游出，但無細胞增殖，細胞長時間處于停滯狀態(tài)以致難以傳代；

    3.  有細胞增殖，傳若干代后停止生長或衰退死亡；

    4.  傳數(shù)代后細胞增殖緩慢，經(jīng)過一段停滯期后，才又呈旺盛生長狀態(tài)，形成穩(wěn)定生長的腫瘤傳代細胞系。

    以上現(xiàn)象說明腫瘤細胞對體外生存條件有較高的要求，并需經(jīng)過對新環(huán)境的適應(yīng)才能生長，因此欲獲得好的培養(yǎng)效果，不能局限于一般培養(yǎng)法，必須采用一些特殊的措施。


    材料與儀器

    瘤組織
    Hanks
    棉球

    步驟

    一、適宜底物


    如：把經(jīng)過純化的細胞接種在不同的底物上，如鼠尾膠原底層、飼細胞層等。

    二、生長因子

    應(yīng)用促細胞生長因子，向培養(yǎng)液中增加一種或幾種促細胞生長因子。根據(jù)細胞種類不同選用不同的促生長物，常用有胰島素、氫化可的松、雌激素以及其它生長因子。

    三、動物體媒介培養(yǎng)

    為提高腫瘤細胞對體外培養(yǎng)環(huán)境的適應(yīng)力和增加有活力癌細胞（干細胞）的數(shù)量，可采用動物體轉(zhuǎn)嫁接種成瘤后，再從動物體內(nèi)取出進行培養(yǎng)，能提高體外培養(yǎng)的成功率。受體動物以裸鼠最好。

    1.  瘤塊接種

    取新鮮瘤組織，用Hanks液洗凈血污，切成1~3 毫米小塊，用穿刺針頭吸一小瘤塊，用酒精棉球擦拭動物腋部后，直接刺入皮下，注入瘤塊。

    2.  飼養(yǎng)觀察，待腫瘤生長達較大體積后，剝?nèi)〕隽鼋M織。

    3.  進行體外培養(yǎng)。

    4.  為防止失敗，仍取部分瘤組織繼續(xù)在裸鼠體內(nèi)傳代。通過裸鼠媒介接種，有活力的腫瘤細胞數(shù)量增多，細胞培養(yǎng)易于成功。
     
    腫瘤細胞培養(yǎng)方法與培養(yǎng)正常細胞*相同，但成功率比正常細胞高。


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