倒置顯微鏡的使用

材料與儀器

倒置顯微鏡 擦鏡紙

步驟

1. 確保顯微鏡（配有相差10×、20× 或40× 的物鏡及聚光器和合適的相差環(huán)）潔凈（用 70 % 乙醇擦拭載物臺。如果有必要，用擦鏡紙清潔物鏡）。
   
   2. 打開電源，將燈光強度從最-低開始調至合適的強度，而不是直接打到強光。
   
   3. 檢查光源與聚光器的銜接：
   
   (a)將一張染色切片、培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿放在載物臺上；
   
   (b)關閉視場光圈；
   
   (c)聚焦在可變光闌上；
   
   (d)將可變光闌成像調整到視野的中央。
   
   4. 將相差環(huán)調至中央：
   
   (a)如果顯微鏡配有相差望遠鏡，將之插入標準目鏡位置，然后聚焦于相差環(huán)，檢査聚光器環(huán)（黑色背景中的白環(huán)）是否與物鏡環(huán)（白色背景中的黑環(huán)）同軸；
   
   (b)如果沒有相差望遠鏡，則將染色的標本換為沒有染色的培養(yǎng)物（活的或固定的培養(yǎng)物），重新聚焦，調整相差環(huán)，直到獲得最-優(yōu)對比。
   
   5. 觀察細胞。10× 相差物鏡作為常規(guī)觀察已足夠，4× 相差物鏡不能提供足夠的細節(jié)資料，而高于 10× 的放大倍數則限制了觀察區(qū)域。
   
   (a)注意生長期（例如，稀疏、亞匯合、匯合、致密）；
   
   (b)注意細胞狀態(tài)（例如，清亮、透明或有顆粒、有空泡等）。
   
   6. 檢査培養(yǎng)基的清亮程度（例如，無碎片、漂浮的顆粒、污染跡象等），根據需要選擇一個放大倍數更高的物鏡。
   
   7. 記錄觀察的結果。
   
   8. 旋低變阻器（把燈光調暗），關掉電源。
   
   9. 將培養(yǎng)液放回孵箱，或放在超凈臺上進行無菌操作。