穩(wěn)定載體時，為什么載體上通常有兩個抗性基因？

構建的載體上有兩個抗性基因，但一般只有一個抗性用來篩細胞。兩個抗性基因的本質區(qū)別是什么呢？

我們來看看這個例子，現(xiàn)在這個是pcDNA3.1質粒的圖譜，載體上有兩個抗性基因，Amp（氨芐青霉素）和Neo（新霉素）。

氨芐青霉素是在bla啟動子驅動下表達，bla是原核表達啟動子，在大腸桿菌可以表達，因此，轉化后的質粒用Amp可以篩選出來。

而新霉素是在SV40啟動子驅動下表達，SV40是真核表達啟動子，轉入真核細胞后表達，所以只有轉進了載體的細胞才能被篩選出來。

所以，穩(wěn)定轉染時，載體上的兩個抗性基因，一個用于構建克隆時篩選細菌，另一個用來對轉染細胞的篩選。

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