高效率轉(zhuǎn)染BV-2小鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑

一、細(xì)胞轉(zhuǎn)染簡介：

隨著分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展，轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制真核細(xì)胞基因功能的常規(guī)工具。在研究基因功能、調(diào)控基因表達(dá)、突變分析和蛋白質(zhì)生產(chǎn)等生物學(xué)試驗(yàn)中，其應(yīng)用越來越廣泛。

轉(zhuǎn)染 ，是將外源性基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)的一種專門技術(shù)。隨著基因與蛋白功能研究的深入，轉(zhuǎn)染目前已成為實(shí)驗(yàn)室工作中經(jīng)常涉及的基本方法。轉(zhuǎn)染大致可分為物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過物理方法將基因?qū)爰?xì)胞的范例;化學(xué)介導(dǎo)方法很多，如經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法、和多種陽離子物質(zhì)介導(dǎo)的技術(shù);生物介導(dǎo)方法，有較為原始的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)染，和現(xiàn)在比較多見的各種病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)。

理想細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法，應(yīng)該具有轉(zhuǎn)染效率高、細(xì)胞毒性小等優(yōu)點(diǎn)。病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)，是目前轉(zhuǎn)染效率較高的方法，同時(shí)具有細(xì)胞毒性很低的優(yōu)勢。但是，病毒轉(zhuǎn)染方法的準(zhǔn)備程序復(fù)雜，常常對(duì)細(xì)胞類型有很強(qiáng)的選擇性，在一般實(shí)驗(yàn)室中很難普及。其它物理和化學(xué)介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染方法，則各有其特點(diǎn)。

需要指出的一點(diǎn)，無論采用哪種轉(zhuǎn)染技術(shù)，要獲得較優(yōu)的轉(zhuǎn)染結(jié)果，可能都需要對(duì)轉(zhuǎn)染條件進(jìn)行優(yōu)化。影響轉(zhuǎn)染效率的因素很多，從細(xì)胞類型、細(xì)胞培養(yǎng)條件和細(xì)胞生長狀態(tài)，到轉(zhuǎn)染方法的操作細(xì)節(jié)，都需要考慮。

二、Zeta Life 轉(zhuǎn)染試劑介紹：

Zeta Life轉(zhuǎn)染試劑是世界首*入細(xì)胞后可以被代謝的新型小分子多肽轉(zhuǎn)染試劑，對(duì)細(xì)胞無毒性，不易出現(xiàn)細(xì)胞死亡，不激活細(xì)胞免疫機(jī)制。Zeta Life高效率轉(zhuǎn)染BV-2小鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑采用的是新型小分子多肽材料，其特點(diǎn)是非脂質(zhì)體材料，大小是80nm左右，由于形狀是圓形的，不會(huì)對(duì)細(xì)胞有物理性損傷，材料表面有特異性結(jié)合接頭，只特異性識(shí)別DNA、RNA，對(duì)血清成分（如細(xì)胞因子、蛋白、內(nèi)毒素等）不識(shí)別也不結(jié)合；特異性接頭與核酸形成轉(zhuǎn)染復(fù)合物，轉(zhuǎn)染復(fù)合物通過細(xì)胞主動(dòng)吞噬進(jìn)入細(xì)胞，進(jìn)入細(xì)胞后可以被代謝的新型小分子多肽材料，對(duì)細(xì)胞無內(nèi)毒素影響，不易出現(xiàn)細(xì)胞死亡。轉(zhuǎn)染效率高，適用細(xì)胞種類多，可轉(zhuǎn)染質(zhì)粒DNA、siRNA和小動(dòng)物活體轉(zhuǎn)染。

Zeta Life高效率轉(zhuǎn)染BV-2小鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑

成功轉(zhuǎn)染BV-2小鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞

三、轉(zhuǎn)染條件

細(xì)胞密度：60%左右

質(zhì)粒DNA濃度：700ng/ul

質(zhì)粒DNA大小：6500bp

培養(yǎng)板：24孔板

轉(zhuǎn)染試劑用量：3ul

質(zhì)粒DNA用量：電訊

轉(zhuǎn)染試劑：AD600075，Zeta Life Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑

轉(zhuǎn)染時(shí)間：48小時(shí)

培養(yǎng)基：Z7010FBS-500澳洲胎牛血清

細(xì)胞凍存：CE70100T無血清細(xì)胞凍存液

細(xì)胞活力檢測：K009-500，cck8

四、Zeta Life轉(zhuǎn)染試劑系列規(guī)格價(jià)格：                    

品牌：美國Zeta Life  貨號(hào)：AD600025    0.25ml/詢價(jià)

品牌：美國Zeta Life  貨號(hào)：AD600050    0.5ml/詢價(jià)

品牌：美國Zeta Life  貨號(hào)：AD600075    0.75ml/詢價(jià)

品牌：美國Zeta Life  貨號(hào)：AD600150    1.5ml/詢價(jià)

品牌：美國Zeta Life  貨號(hào)：AD600500    5ml/詢價(jià)

品牌：美國Zeta Life  貨號(hào)：AD601000    10ml/詢價(jià)

五、成功轉(zhuǎn)染細(xì)胞案例分享：

Zeta Life介紹：

美國 Zeta Life 公司成立于 1989 年，是國際無血清細(xì)胞培養(yǎng)基 DMEM/F12 主要完成人，有三十多年的胎牛血清、無血清細(xì)胞培養(yǎng)基、以及干細(xì)胞、免疫細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞等多種不同類型哺乳動(dòng)物細(xì)胞的無血清培養(yǎng)液生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)；也是目前世界胎牛血清、無血清培養(yǎng)基最大的 OEM 供應(yīng)商之一；每批血清均有完整的血源證明文件、獸醫(yī)師檢驗(yàn)證明及品質(zhì)測試報(bào)告；ZETA LIFE 血清在 100 級(jí)的無菌間采用全自動(dòng)方式制造生產(chǎn)，具有良好的可再現(xiàn)性及可追溯性。  2018 年 Zeta Life 公司與美國加利福尼亞大學(xué)舊金山校區(qū)聯(lián)合開發(fā)用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子轉(zhuǎn)染試劑，此技術(shù)成為新的全球蛋白功能、免疫細(xì)胞及干細(xì)胞治療、研發(fā)及生產(chǎn)的主要關(guān)鍵技術(shù)之一。深圳市安培生物科技有限公司是美國 Zeta Life 公司的中國深圳地區(qū)總代理。